La Caesalpinia Spinosa (Mol.) es un árbol originario de los Andes, produce frutos que cuando secos contiene por lo menos dos subproductos con demanda internacional, los taninos de las vainas molidas y las gomas de las semillas procesadas (Rojas, 2007). La vaina separada de la semilla se muele y es un extraordinario producto de exportación como materia prima para la obtención de ácido tánico y gálico muy usado en las industrias peleteras, así como también en las industrias farmacéutica, química, pinturas, entre otras. De las semillas se obtiene mediante un proceso térmico-mecánico una goma de uso alimenticio. (Malaga Webb y Asociados, 2009). 

Perú es el primer exportador mundial de harina de TARA, pero solo cubre aproximadamente el 20% de la demanda mundial, por lo que existe una demanda insatisfecha del 80% (Power plugs demo effect, 2005). A partir del 2009, se identificaron árboles plus seleccionados por sus buenas características morfo-agronómicas con rendimientos superiores a 40 kg de vainas por árbol y elevada producción de taninos.

Sin embargo, al ser poblaciones silvestres, las cuales han sido el resultado tanto de procesos de autofecundación y fecundación cruzada no controlados por el hombre, hace que se desconozca el origen de estos árboles y su estabilidad genética, por lo que la multiplicación y reproducción de estos individuos por semilla sería un gran riesgo de cara a garantizar una elevada y estable producción en el futuro. El desarrollo de una metodología de propagación clonal de C. Spinosa mediante técnicas biotecnológicas, permitiría no solo disponer de mayores volúmenes de plantas que mantengan las características de alta productividad y elevada concentración en taninos, sino que al mismo tiempo reduciría el problema de suministro de semilla para el establecimiento de plantaciones comerciales. El objetivo de este trabajo fue lograr el establecimiento in vitro de yemas axilares de C. Spinosa, obtenidas de plantas donantes revigorizadas a partir de injertos realizados con estacas de árboles plus.

Como material vegetal se emplearon yemas axilares obtenidas de plantas revigorizadas en casa de cultivo, las cuales fueron obtenidas mediante injertos a partir de estacas de árboles adultos previamente seleccionadas por sus características morfo-agronómicas y rendimiento. En la casa de cultivo, las plantas donantes fueron manejadas en condiciones de umbráculo (baja intensidad luminosa) y de forma preventiva en busca de reducir pérdidas por contaminación microbiana en la fase de establecimiento in vitro, se aplicaron tratamientos fúngicos.

El empleo de NaClO al 3.0% fue efectivo para la desinfección de los explantes, pues independientemente del tiempo utilizado el porcentaje de explantes libres de contaminantes microbianos visibles superó en todos los tratamientos el 90.0%. Desde el punto de vista estadístico, no se observaron diferencias significativas entre los diferentes tratamientos, razón por la cual, se decidió seleccionar para la desinfección de los explantes, el tratamiento compuestos por una solución de NaClO al 3.0% durante 10 min.

En esta fase del proceso también se logró reducir la presencia de explantes con una fuerte oxidación fenólica, afectación que había sido una constante desde los primeros intentos por lograr el establecimiento in vitro de esta especie. En este sentido, los resultados obtenidos indican que los manejos realizados tanto a las plantas del banco de donante como a los explantes antes y durante el proceso de establecimiento in vitro fueron efectivos y redujeron significativamente la ocurrencia de este fenómeno. Como se conoce, tanto la contaminación microbiana, como la fenolización han sido dificultades que han limitado la propagación in vitro de especies forestales (Rivero, 2001; Teixeira, 2001).

Los resultados obtenidos con el empleo de NaClO al 3.0% durante 10, 20 y 30 min para la desinfección de las yemas axilares de Guarango fueron superiores a los descritos por otros autores para esta misma especie, por ejemplo, Lozano (2011) refiere un 67% de explantes libres de contaminantes microbianos con un tratamiento de NaClO al 1.5% durante 15 minutos, mientras que, Sánchez (2006) obtuvo un 63% de explantes establecidos in vitro y libres de contaminantes microbianos al desinfectar con una solución de 1.0 ml l-1 de formol al 37% durante 40 minutos. Ambos autores mencionaron la ocurrencia de una fuerte oxidación fenólica durante el desarrollo de esta fase del proceso.

Uno de los factores que quizás influyó en este resultado, pudo estar relacionado con la escasa oxidación fenólica que se obtuvo en el presente estudio como respuesta a la aplicación de diferentes manejos y productos antioxidantes antes y durante el desarrollo de la fase de establecimiento in vitro. Los resultados obtenidos permitieron diseñar un esquema para el establecimiento in vitro de C. Spinosa a partir de yemas axilares de plantas donantes revigorizadas obtenidas a partir de injertos de estacas tomadas de árboles adultos.

Se determinó que el mejor tratamiento para la desinfección de las yemas axilares consistió en una solución de Hipoclorito de sodio al 3.0% y 10 minutos de inmersión de los explantes en la misma, con lo cual se logró un 90% de explantes libres de contaminantes microbianos visibles. Mientras que, la mejor respuesta in vitro de las yemas axilares en la fase de establecimiento se logró con una concentración de 0.25 mg l-1 de 6-BAP al brotar el 96.66% de las mismas, con una longitud de 6.71 cm y un promedio de dos nuevos brotes por explante.